Affinitäts-Kapillarelektrophorese von Viren

Rhinoviren bestehen aus einem Capsid aus Proteinen, weiches das RNA Genom umhüllt. Sie besitzen ein Zeta- Potential, und können deshalb unter dem Einfluß eines elektrischen Feldes wandern. Es ist evident, daß das Wanderungsverhalten durch die Anbindung von Antikörpern, löslichen Virus-Rezeptoren oder kleinen, antiviral wirkende Verbindungen beeinflußt werden kann. Dies kann entweder durch die Änderung der Masse des Viruspartikels, seiner Oberflächenladung, seiner Konformation, oder durch einer Kombination dieser Effekte verursacht werden. Im vorliegenden Projekt sollen Kapillar-elektrophoretische (CE) Techniken angewendet werden, um Bindungsgrößen wie z.B. Komplexkonstanten oder die Stöchiometrie des Addukts zu bestimmen. Die entscheidenden Parameter der verwendeten Techniken - wie Affinitäts-Zonenelektrophorese oder Affinitäts- Isoelektrische Fokussierung in Kapillaren - werden systematisch untersucht, und die Bindungsgrößen bestimmt. Das Resultat der Untersuchungen soll zur Ausarbeitung einer leistungsfähigen Methode führen, welche die Trennung von nativen Viren und Virus-Ligand-Komplexen ermöglicht. Es wird weiters die Entwicklung einer CE- Methode angestrebt, welche einfach und schnell ein Screening der unterschiedlichen (nieder- oder hochmolekularen) Verbindungen auf ihr Neutralisationpotential gegen Schnupfenviren ermöglicht. Zusätzlich ist es die Intention des vorliegenden Projekts, empfindliche Methoden zu entwickeln, um Konformationsänderungen von Viren zu bestimmen, welche bei der Bindung von antiviral wirkenden Verbindungen auftreten. Die Kenntnis jener Parameter, welche die Trennung dieser großen, makromolekularen Komplexe bestimmen, soll die Erweiterung des Anwendungsbereiches von CE-Methoden zur Analyse von antiviralen Wirkstoffen gegen andere Viren ermöglichen