miR-17~92 in der Entwicklung von B Zell Lymphomen

In meinem Projekt beabsichtige ich die Entwicklung von reifen humanen B Zell Lymphomen anhand von verbesserten Mausmodellen präziser als bisher üblich nachzuahmen um deren Pathogenese im Detail zu verstehen. Um dieses Ziel zu erreichen beabsichtige ich die Expression von je einem tumor-fördernden Onkogen in Kombination mit einer ebenfalls onkogenen microRNA (miRNA) in verschiedenen Entwicklungsstadien der B- Zell-Reifung anzuschalten und prä-maligne B Zellen als auch entstehende Tumore in diesen Mäusen genau zu charakterisieren. MiRNAs sind nicht-proteincodierende RNAs die als zusätzlicher zellulärer Mechanismus die Expression von Proteinen regulieren. MiR-17~92 spielt vor allem während der B Zell Entwicklung eine wichtige Rolle und wurde auch bereits als Onkogen in verschiedenen human B Zell Lymhomen identifiziert. Überexpression von miR-17~92 alleine führt allerdings nicht zur Entwicklung eines Tumors - konsistent mit dem Modell dass zur Tumorentstehung die Deregulierung mehrerer Onkogene und Tumorsuppressoren notwendig ist. Daher beabsichtige ich das onkogene Potential von miR-17~92 in Kombination mit den bekannten Onkogenen c-Myc oder c-Jun zu studieren. Die meisten derzeit üblichen Mausmodelle exprimieren ein definiertes Transgen in allen Immunzellen oder zumindest in allen Zellen eines bestimmten Typs, z.B. in allen B Zellen. Dies führt meist zu der Entwicklung von unreifen Lymphomen und spiegelt daher die humane Situation nur schlecht wider, da sich hier vor allem reife B Zell Lymphome entwickeln. Ich plane dieses Problem zu umgehen, indem ich die Onkogene gezielt erst in verschiedenen Entwicklungsstadien der B Zelle aktivieren werde. Dafür können Mausmodelle verwendet werden, die entweder miR-17~92 und c-Myc oder miR-17~92 und c-Jun erst dann überexprimieren wenn eine "aktiviernde" Cre-Rekombinase ebenfalls in den Zielzellen exprimiert wird. Um diese Cre-Rekombinase nur in den gewünschten B Zelltypen zu exprimieren wird dieses Enzym unter Kontrolle von Promotoren, die nur in bestimmten B Zell Entwicklungsstadien aktiv sind, produziert. Dafür plane ich CD19-cre- (aktiv in allen B Zellen von frühen Entwicklungsstadien an), CD21-cre- (aktiv von Transition unreifer zu reifen B Zellen an) und C 1-cre- (aktiv von der Keimzentrumsreaktion an) "Aktivator" Mausstämme zu verwenden. Eine weitere Schlüsselfrage in meinem Projekt beschäftigt sich mit dem Versuch die sporadische Natur zufälliger Mutationen besser zu imitieren indem ich die Expression der Onkogene zufällig in nur wenigen B Zellen induziere. Das Ziel meines Projektes ist es zu verstehen ob und wie die initiale Deregulation von miR-17~92 in Kombination mit einem anderen Onkogen (c-Myc oder c-Jun) zur Bildung eines bestimmten B Zell Lymphom-Typs und eines definierten Musters genetischer Veränderungen in einer Umgebung die die der "natürlichen" Tumorigenese ähnlich ist, führt. Durch die Charakterisierung von deregulierten Signalwegen in verschiedenen B-Zell Lymphomen sollen neue Strategien zur Therapie von B Zell Lymphomen entwickelt und gängige Therapien verbessert werden.