Neue Mechanismen der c-erbB-2 Aktivierung

Signaluebertragung durch C-erbB Rezeptortyrosinkinasen repraesentiert einen wichtigen Mechanismus zur Kontrolle der Zellproliferation sowohl in der normalen Physiologie als auch bei malignen Erkrankungen. Der "verwaiste" C-erbB-2 Rezeptor zeigt eine hohe Tyrosinkinaseaktivitaet und dient als Heterodimerisierungspartner für die anderen Rezeptoren. Es werden Daten praesentiert die zeigen, dass der Zeitverlauf der C-erbB-2 Phosphorylierung sich aus einer stabilen und einer kurzzeitigen Komponente zusammensetzt, wobei die Dynamik der Dimerisierung von C-erbB-1 und -2 mit der stabilen Komponente uebereinstimmt. Diese und bereits frueher gewonnene Daten des Gastlabors zeigen Signalpropagationsmechanismen entlang der Zellmembran, die durch das klassische Modell der Rezeptordimerisierung alleine nicht erklaerbar sind. Der vorliegende Projektvorschlag zielt daher darauf ab, die Signaluebertragungssmechanismen von C-erbB-2 im C-erbB-1/C-erbB-2 Modell zu erhellen. FRET Untersuchungen sollen die Zeitverlaeufe der Dimerisierung und Phosphorylierung miteinander vergleichen. Die Autophophosphorylierung von C-erbB-1 und -2 wird mit Hilfe neuartiger Autophosphorylierungssensoren, die hier beschrieben werden, in Echtzeit in lebenden Zellen untersucht werden. Mit Hilfe Kinase inaktiver Varianten dieser Sensoren soll weiters die Frage des relativen Beitrages von C-erbB-1 und C-erbB-2 geklaert werden. Es wurde bereits frueher gezeigt, dass die Hemmung von Tyrosinphosphatasen fuer die laterale Signalausbreitung des C-erbB-1 Rezeptors, wahrscheinlich aufgrund der Erzeugung reaktiver Sauerstoffverbindungen (RSV), verantwortlich ist. Deswegen sollen Hemmer der RSV Biosynthese, sowie reduzierende Agenzien, die mit den RSV reagieren, zum Einsatz kommen um RSV als moegliche Ursache fuer die beobachtete kurzeitige C-erbB-2 Phosphorylierung, bei gleichzeitiger Abwesenheit von Heterodimerisierung zu untersuchen.