Angiogeneseindukion im ischämischen Myokard mittels CD34+ Zellen

1) Untersuchung, ob Stammzellen aus dem peripheren Blut (HSC, CD34+) in ischämisches Myokard wandern, sich in Endothelzellen transformieren und an der Bildung von Blutgefäßen beteiligt sind. Isolierung von CD34+ Zellen aus peripherem Blut, Bestimmung der Oberflächenmarker dieser Zellen, Färben mit DiI und Injektion in nackte Mäuse (scid-mice) und histologische Untersuchung, um zu sehen, ob diese Zellen in das 2 Tage vorher durch Nadelstiche verletzte Myokard wandern und in Gefäßneubildung involviert sind. 2) Überprüfung der Rezeptor-Ligand Interaktion zwischen isolierten CD34 Zellen und humanem Endothel. Zellkultur CD34 positiver Zellen auf humanen Endothelzellschichten, um zu untersuchen, ob diese Zellen das Aussehen ändern und beginnen, Gefäße zu bilden. Charakterisierung der Oberflächenmarker zur Feststellung ob diese Zellen sich zu Endothelzellinien weiterdifferenzieren. Adhäsionsassays zur Untersuchung der involvierten Liganden. 3) Transfection humaner CD34+ Zellen unter Verwendung verschiedener Vektoren mit Genen von Gefäßwachstumsfaktoren in vivo und in vitro. Transfektionsvehikel: Polyetylenimine, Adenovirusverstärkte Transfektion und Lipofektamin. Readoutassay: Green fluorescent Protein (GFP). Für in vitro als auch in vivo Transfektion wird das effizienteste Vehikel verwendet.