Re-engineering Glycosylierung in Insektenzellen

Fukosylierung hat zumeist einen negativen Einfluß auf die Effektivität der von Antikörpern vermittelten Zytotoxizität. Dennoch werden in der Produktion von therapeutischen IgG fukose-übertragende Zell-linien verwendet. Um die IgG-Effizienz zu steigern wäre eine Senkung oder vermeidung der Fukose-Übertragung wünschenswert. Da insektenzellen ein kostengünstiges Produktionsmittel zur Herstellung pharmazeutischer Glykoproteine darstellen, wird in einem neuen Ansatz der intrazelluläre Fukosepool mit Knock-down-Strategien manipuliert. Dies sollte unter anderem auch die immunogenen fukose-hältigen Strukturen eliminieren. Weiters sind Insektenglykane wegen der endogenen Hexosaminidase-Aktivität kürzer als die von Säugern, da ihnen die potentiellen Substrate für Galaktosyl- und Sialyltransferasen fehlen. Daten, die wir in unseren Labor über die GDP- Fukose Biosynthese gewonnen haben, werden uns helfen Orthologe in biotechnoloisch relevanten Zellen aufzufinden. Ziel des Projekts ist es die Palette der vorhandenen Insektensysteme hinsichtlich ihrer Kapazität zur Erzeugung von menschenähnlicheren pharmazeutischen Glykoproteinen zu erweitern.

Fukosylierung hat zumeist einen negativen Einfluß auf die Effektivität der von Antikörpern vermittelten Zytotoxizität. Dennoch werden in der Produktion von therapeutischen IgG Fukose-übertragende Zell-linien verwendet. Um die IgG-Effizienz zu steigern wäre eine Senkung oder Vermeidung der Fukose-Übertragung wünschenswert. Da Insektenzellen ein kostengünstiges Produktionsmittel zur Herstellung pharmazeutischer Glykoproteine darstellen, war es das Ziel in einem neuen Ansatz den intrazelluläre Fukosepool mit Knock-down- Strategien zu manipulieren. Dies sollte unter anderem auch die immunogenen Fukose-hältigen Strukturen eliminieren. Daten, die wir in unseren Labor über die GDP-Fukose Biosynthese gewonnen haben, haben uns geholfen Orthologe in biotechnologisch relevanten Zellen aufzufinden. Wir konnten Fukosylierung in einer Drosophila Zellinie erfolgreich unterdrücken - die Methode dorthin ist möglicherweise an anderen Insektenzellinien anwendbar. Eine relevante Patentanmeldung ist geplant.